工作原理
压力蒸汽灭菌器的工作原理就是通过高温高压状态下的水蒸汽及其释放的大量的潜热对有细菌的菌体物质进行*的灭菌处理。当所产生的蒸汽与有菌的物品进行充分接触的时候，可以通过凝结成水进而释放出大量的潜热使温度能够迅速得到提升，zui终能够达到灭菌和使灭菌效果加快的目的。压力蒸汽灭菌器中所存在的一些混合气体，主要与实际的温度和力的关系比较密切。相关的实验研究结果充分证明，只有当压力蒸汽灭菌器中所存在混合气体的实际温度和压力同时达到一个*值的时候，其灭菌的实际效果才能达到*水平。
准备：首先将内层灭菌桶取出，在向外层锅内加入适量的水，使水面与三角搁架相平为宜。一般来说，每次灭菌前都应加水。
放回灭菌内桶，并装入待灭菌物品：将准备灭菌的培养基及空玻璃器皿用牛皮纸包好，装入锅内套层中。
加盖：先检查锅盖上的密封圈是否良好，并去除污物，再将锅盖上的排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内，然后盖严锅盖，采用对角式均匀拧紧锅盖上的螺栓，使螺栓松紧一致，勿使漏气。也有些不是用螺栓，而是像家庭使用的高压锅一样，只要将锅盖与锅的槽口对准，顺时针转动，卡到位即可。
用电炉或煤气加热(大部分用电热管加热)，并同时打开排气阀，以便锅内水沸腾后排出锅内的冷空气。这里要特别注意，灭菌锅内冷空气的排除是否*极为重要。因为空气的膨胀压力大于水蒸汽的膨胀压力，所以当水蒸汽中含有空气时，在同一压力下，含有空气蒸汽的温度低于饱和蒸汽的温度。通常应等锅内水烧开后排气3~5min，待冷空气*排尽后，关上排气阀，让锅内的温度随蒸汽压力增加而逐渐上升。另一种排除冷空气的方法是：按上述方法盖紧锅盖，加热使锅内产生蒸汽。当压力表指针达到33.78kPa时，打开排气阀，将冷空气排出，此时压力表指针下降。当指针下降至零时，冷空气排尽，关上排气阀。当锅内压力上升到所需压力时，控制热源，维持压力至所需时间。
达到灭菌所需时间后，切断电源或关闭煤气。让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的压力下降到0时，打开排气阀，旋松螺栓，打开锅盖，10min后取出灭菌物品。千万要注意，如果压力未降到0就打开排气阀，会因锅内压力突然下降，使容器内的液体由于内外压力不平衡而冲出烧瓶口或试管口，造成棉塞沾染培养基而发生污染。
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